URGENT! recherche technique labteks!

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URGENT! recherche technique labteks!

Message par Admin le Ven 2 Avr - 10:50

nous sommes à la recherche de techniques d'arrêt des labteks clones! la nôtre ne fonctionne plus du tout! plus de mitoses ou alors toutes recroquevillées sur elles-mêmes!
notre technique actuelle: 1h de demecol 40 min citrate 37°C 0.8% ( on a essayé le KCl 0.32%, pas mieux!)
10 min prefix temp ambiente
20 min puis 15 min puis 10 min de fix à TA. et séchage.
le tout sous thermotron (de presque 10 ans) 23°C et 45% d'humidité
( puis séchage 2h sous thermotron avant denat)

donc....................A L'AIDE!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!

hypothèse 1 :le choc ne convient plus, il a marché pendant 20 ans et aujourd'hui plus!
hypothèse 2: le méthanol ou l'acide acétique est mauvais ( en cours de test avec nouveaux lots)
hypothèse 3: le thermotron est naze!

merci de votre aide providentielle!!!!

Sandrine
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Re: URGENT! recherche technique labteks!

Message par BIOFFICE le Sam 3 Avr - 17:25

Salut .
Ce ne serait pas plutôt votre " démecol" ? ... un lot foireux..? vue ce que tu décris ...?
Nous utilisons du "colcémide" ( je n'ai pas les référances là désolé) 70microL par labteck pdt 50min puis sur Técan avec préchoc (SVNN à 44°C ) rapide , Choc 10 min ,Préfix , Fix 3x10min ...Séchage vers 24°c et 50% d'humid.
Voila ... bon courage Wink
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BIOFFICE

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Re: URGENT! recherche technique labteks!

Message par picot le Jeu 8 Avr - 12:23

bonjour, pour les techniques sur labtek nous n arrretons pas les clones,nous mettons directement le citrate 0.8% et nous avons de bon resultat!!si c est le demecol qui ne marche plus essayez sans!!!!
sinon ,nous utilisons de la colchicine(20ml dans 22 ml de pbs) bon courage

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