FISH sur LA non cultivé

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FISH sur LA non cultivé

Message par Evelyne S le Dim 9 Jan - 1:39

Je suis à la recherche d'une technique rapide.
Surtout concernant le traitement du liquide avant la FISH.
Merci

Evelyne S

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Re: FISH sur LA non cultivé

Message par Admin le Dim 9 Jan - 13:26

on utilise la même technique que pour les aneuvysions:
prélèvement de 1.5mL de LA, centri, fixation 20 min( choc au kcl, prefix avant si hémorragique), centri, étalement.
séchage avant de prétraiter: pepsine...etc puis technique classique de fish.
c'est pas super rapide, mais il faut prétraiter sinon le marquage n'est pas top.
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Re: FISH sur LA non cultivé

Message par BIOFFICE le Dim 9 Jan - 15:56

Salut.
Nous avons à peut prés la même technique Wink on utilise 3 à 5ml de liquide, centri , 20 min dans de la trypsine EDTA, centri, choc KCl, préfix, fix, étalement, prétraitement à la pépsine...etc.. évidemment c'est pas super "rapide" mais ça marche plutôt bien Wink
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Re: FISH sur LA non cultivé

Message par vic le Dim 9 Jan - 22:38

salut Evelyne,
Nous utilisons également la même technique FISH que celle décrite par ADMIN et BIOFFICE, mais nous avons également une autre technique que nous venons de mettre au point il y a 2 mois et qui marche bien mais qui nécéssite d'avoir une CYTOSPIN.
- Centrifuger le LA
- retirer le surnageant et ajouter environ 3 ml de NaCl 9%
- mélanger et centrifuger
- adapter le surnageant en fonction du trouble
- préparer les lames pour la cytospin et ajouter 2 à 4 gouttes (selon le trouble)
- lancer la cytospin (vitesse et temps à adapter en fonction de votre cytospin, chez nous 5 min à 300 trs)
- vérifier l'étalement et si satisfait on fixe 10 min
puis on lance la technique habituelle pepsin-HCl.......
Voilà cette technique est effectivement plus rapide et chez nous elle a été mise au point pour les prélèvement pauvre ou précoce mais peut-être adaptée pour tous les prélèvements.
A plus

vic

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question pour vic

Message par colvez le Mar 25 Jan - 13:09

pouvez vous me redonner la concentration de nacl que vous utilisez pour la technique cytospin
cordialement
ic

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