FISH sur LA non cultivé
5 participants
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FISH sur LA non cultivé
Je suis à la recherche d'une technique rapide.
Surtout concernant le traitement du liquide avant la FISH.
Merci
Surtout concernant le traitement du liquide avant la FISH.
Merci
Evelyne S- Localisation : Strasbourg
Nombre de messages : 12
Date d'inscription : 09/11/2010
Réputation : 0
Points : 32
Age : 65
Re: FISH sur LA non cultivé
on utilise la même technique que pour les aneuvysions:
prélèvement de 1.5mL de LA, centri, fixation 20 min( choc au kcl, prefix avant si hémorragique), centri, étalement.
séchage avant de prétraiter: pepsine...etc puis technique classique de fish.
c'est pas super rapide, mais il faut prétraiter sinon le marquage n'est pas top.
prélèvement de 1.5mL de LA, centri, fixation 20 min( choc au kcl, prefix avant si hémorragique), centri, étalement.
séchage avant de prétraiter: pepsine...etc puis technique classique de fish.
c'est pas super rapide, mais il faut prétraiter sinon le marquage n'est pas top.
Re: FISH sur LA non cultivé
Salut.
Nous avons à peut prés la même technique on utilise 3 à 5ml de liquide, centri , 20 min dans de la trypsine EDTA, centri, choc KCl, préfix, fix, étalement, prétraitement à la pépsine...etc.. évidemment c'est pas super "rapide" mais ça marche plutôt bien
Nous avons à peut prés la même technique on utilise 3 à 5ml de liquide, centri , 20 min dans de la trypsine EDTA, centri, choc KCl, préfix, fix, étalement, prétraitement à la pépsine...etc.. évidemment c'est pas super "rapide" mais ça marche plutôt bien
BIOFFICE- Localisation : bordeaux
Nombre de messages : 60
Spécialités : Anténatal ( Trophos, Liq. Amnio. ) postnatal , FISH...
Date d'inscription : 10/02/2009
Réputation : 21
Points : 102
Re: FISH sur LA non cultivé
salut Evelyne,
Nous utilisons également la même technique FISH que celle décrite par ADMIN et BIOFFICE, mais nous avons également une autre technique que nous venons de mettre au point il y a 2 mois et qui marche bien mais qui nécéssite d'avoir une CYTOSPIN.
- Centrifuger le LA
- retirer le surnageant et ajouter environ 3 ml de NaCl 9%
- mélanger et centrifuger
- adapter le surnageant en fonction du trouble
- préparer les lames pour la cytospin et ajouter 2 à 4 gouttes (selon le trouble)
- lancer la cytospin (vitesse et temps à adapter en fonction de votre cytospin, chez nous 5 min à 300 trs)
- vérifier l'étalement et si satisfait on fixe 10 min
puis on lance la technique habituelle pepsin-HCl.......
Voilà cette technique est effectivement plus rapide et chez nous elle a été mise au point pour les prélèvement pauvre ou précoce mais peut-être adaptée pour tous les prélèvements.
A plus
Nous utilisons également la même technique FISH que celle décrite par ADMIN et BIOFFICE, mais nous avons également une autre technique que nous venons de mettre au point il y a 2 mois et qui marche bien mais qui nécéssite d'avoir une CYTOSPIN.
- Centrifuger le LA
- retirer le surnageant et ajouter environ 3 ml de NaCl 9%
- mélanger et centrifuger
- adapter le surnageant en fonction du trouble
- préparer les lames pour la cytospin et ajouter 2 à 4 gouttes (selon le trouble)
- lancer la cytospin (vitesse et temps à adapter en fonction de votre cytospin, chez nous 5 min à 300 trs)
- vérifier l'étalement et si satisfait on fixe 10 min
puis on lance la technique habituelle pepsin-HCl.......
Voilà cette technique est effectivement plus rapide et chez nous elle a été mise au point pour les prélèvement pauvre ou précoce mais peut-être adaptée pour tous les prélèvements.
A plus
vic- Localisation : bordeaux
Nombre de messages : 22
Date d'inscription : 22/10/2008
Réputation : 0
Points : 38
question pour vic
pouvez vous me redonner la concentration de nacl que vous utilisez pour la technique cytospin
cordialement
ic
cordialement
ic
colvez- Localisation : toulon
Nombre de messages : 10
Date d'inscription : 23/03/2010
Réputation : 0
Points : 18
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