Echec au moment de la trypsine des trophos.

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Re: Echec au moment de la trypsine des trophos.

Message par nelly le Ven 6 Juin - 13:17

Nous avons le même problème alors que nous utilisons un autre milieu de culture.
On a l'impression que les cellules disparaissent lors de la trypsination.
Malheureusement pas de solution à ce niveau, on fait donc un choc en tube après trypsination pour être sur d'avoir des métaphases.

nelly

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Echec au moment de la trypsine des trophos.

Message par Admin le Mar 11 Mar - 12:18

comme indiqué dans le titre, nous avons des problèmes lors du repiquage des trophos, ceux-ci ne repartent pas ou alors très très lentement avec des mitoses de qualité plus que moyenne.
notre tech: 15min tryp, 25 min collagénase puis dilacération et mise dans deux flacons de 25cm² en chang D
la pousse est souvent très rapide, mais quand on décide de trypsiniser...c'est là que les ennuis commencent! Evil or Very Mad 
les flacons "filles" ne repartent pas, c'est comme si on avait perdu nos petites cellules pourtant très nombreuses au départ...

avez-vous le même problème?
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