pousse liquide amniotique

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Message par musset le Jeu 3 Déc - 21:09

Bonsoir a tous
Depuis 1 an et demi,nous avons demenagé dans des locaux neufs,soi disant "un bijou de technologie",nous rencontrons depuis ce demenagement,de gros soucis de pousse.
Il faut dire que la clim est défaillante,chaud froid permanent en salle de culture, hygrommetrie oscillant de 20 a 90% ,la pousse des liquides et des villosités en culture est correcte,cependant rareté des mitoses apres la technique.
Nous avons fait des tests sur les etuves,aucun résultats.
Nous avons incriminé le surfanios(nettoyant détergeant),aucun résultat.
Au niveau colcémid,le secteur onco hemato et post natal fonctionne donc peu de chance que ca soit la colcemid.
Utilisation de labteks de plusieurs lots,pareille (ensachant que le fabricant a changé,qualité inférieur?
labteks de chez nunc).
Nous somme un peu désemparé,le rendu des résultats se fait tardivement,avec trypsine sur trypsine pour avoir le nombre de mitoses par dossier,aneuvision croissante,d'ou surcroit de travail,cout financier etc.
Vive les locaux hight tech.
Si quelqu'un a quelques solutions..........
D'avance merci.

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Re: pousse liquide amniotique

Message par Admin le Jeu 3 Déc - 22:32

bonjour et bienvenue!
avez-vous pensé au CO2 ( êtes vous en bouteille ou en arrivée directe?).
avez-vous le même problème sur labtek et flacon?
nous aussi on a déménagé pour migrer dans un hopital mère enfant, et résultat la température oscille entre 20 et 27°C ( et l'hygrométrie qui va avec...) les étuves ont du mal à réguler.
on utilise l'hexanios pour les étuves, on le rince après application ( pour être sûr qu'il n'en reste aucune trace...), mais on a remarqué que moins on nettoie les étuves, mieux ça marche ( faut pas chercher!)
quelle est votre technique d'arrêt?
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Message par musset le Jeu 3 Déc - 23:05

Rebonsoir
Tout d'abord merci pour la rapidité de la réponse.
Le CO2 a ete testé,technique labtek et flacon similaire=peu de mitose.
Le surfanios est rincé 3 fois+ un passage a l'alcool effectué tout les 3 mois,en effet le moins on nettoie,mieux c'est.
Qu'entendez vous par technique d'arret:arret de la division en metaphase?
Si c'est cela on bloque la division cellulaire grace a la colcémide.
Encore merci.
Cdt

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Re: pousse liquide amniotique

Message par Admin le Jeu 3 Déc - 23:41

par technique d'arrêt j'entends votre choc (nature et temps), les fixations....
avant l'arrêt des cultures, avez-vous peu de mitoses ou les perdez-vous à l'arrêt?
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culture LA

Message par musset le Ven 4 Déc - 0:10

Notre technique:
-1h colcemid
-35 mn choc (serum de veau nouveau né)
-préfixation:quelques gouttes de carnoy toutes les 2mn dans le choc pdt 15mn
-2 fixations de 15 mn
On a peu de mitoses apres la technique?
Comment peut on voir les mitoses avant la technique?
CDT

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Re: pousse liquide amniotique

Message par Admin le Ven 4 Déc - 10:23

le matin, on choisit les labteks et les flacons à arrêter en fonction de la pousse mais aussi de la présence ou non de mitoses. on a un microscope inversé dans la salle de culture, on juge la nappe ou les clones, les mitoses apparaissent comme de petits point réfringeants au micro. C'est comme ça qu'on sait si on les perd à la technique ou si on n'a vraiment pas de mitose avant l'arrêt...
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Re: pousse liquide amniotique

Message par musset le Ven 4 Déc - 23:01

bonsoir
Merci pour ces renseignements,je vais essayer de correler les points refringeants avec les mitoses apres la technique.
Cdt

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Re: pousse liquide amniotique

Message par nelly le Dim 6 Déc - 23:36

Bonjour
Nous travaillons comme Admin.
Mais nous sommes régulièrement obligé de changer le pourcentage du choc en fonction de la température de la pièce et même de temps en temps, de décaler les heures de changement de milieu la veille de la technique pour récupérer un indice mitotique correct le matin avant de mettre la colcemid.
J'espère que nous aurons pas les même problèmes que vous, car nous devons déménager dans le mois qui vient.
Bon courage

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