choc au svf pour labteks

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choc au svf pour labteks

Message par Admin le Mar 9 Mar - 16:22

bonjour,
depuis de longues années nous faisons un choc au citrate pour les labteks. Mais comme chacun sait, ce qui marchait hier, ne marche pas forcément aujourd'hui....et depuis quelques mois nos clones n'éclatent plus.
On est en cours de changement de milieu de culture, on passe du cytomax vraiment pas très efficace à l'amniomax pour les labteks et on garde le chang D pour les flacons.
quelqu'un a-t-il déjà essayé de faire un choc au SVF sur des clones? si oui à quelle dilution et quel temps? et surtout le résultat!

merci d'avance!
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Re: choc au svf pour labteks

Message par picot le Mar 9 Mar - 17:41

bonjour,nous ,nous faisons le contraire ,on abandonne l ammiomax avec qui nous avons eu de gros soucis de culture pour du cytomax qui lors de nos essais avait tres bien marché !!!j espere que cela continuera!!nous doublons nos labteks :1 lame cytomax + 2 lames ammiochrome et l eclatement se fait au citrate 0.8% pour l instant pas de soucis !

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Re: choc au svf pour labteks

Message par BIOFFICE le Mar 9 Mar - 17:58

Salut.
Nous utilisons du Chang D et cytomax pour les labtech ( chang est nettement meilleur..) et on choc au sérum de veau nouveau né, voici notre recette:
-36ml de SVNN
-2.5 ml de MgCl2 à 2%
-12 ml sérum phi.
-192.5 ml Eau PPI

On choc à 45°C pendant 20minutes ....
voila Wink
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Re: choc au svf pour labteks

Message par Admin le Mar 9 Mar - 18:13

merci pour cette recette on va essayer.
pour ce qui est du cytomax: on l'utilisait en parallèle sur les liquides amniotiques et les villosités. Et on avait remarqué que les villos sur cytomax ne poussaient presque pas et les liquides beaucoup moins. On a échangé les milieux pour les liquides mettant du cytomax dans les flacons et chang sur labteks, et bien c'étaient les flacons qui poussaient moins bien. C'est à rien y comprendre, ce milieu marchait très bien quand on l'a testé et maintenant ça foire...il y a de quoi se prendre la tête dans notre spécialité!!! Sad
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Re: choc au svf pour labteks

Message par Admin le Lun 29 Mar - 13:06

bonjour,
serait-il possible d'avoir une technique d'arrêt au citrate pour les labtek de LA;
A l'origine, on faisait 3mL de citrate 0.8% chaud pendant 40 min puis 1.5mL de fixateur à TA pendant 10min, puis aspiration et mise de fixateur pendant 20min, puis 15 puis 10 et enfin séchage. mais voilà, cela ne fonctionne plus du tout, nos mitoses sont repliées sur elles-mêmes, un vrai sac de noeuds!
donc on en est à essayer différents chocs: citratee0.5%, KCl 0.32%...on ne va pas tarder à essayer le SVF de "bioffice"
si quelqu'un a une idée... Crying or Very sad
notre thermotron est vieux et on se demande s'il régule toujours l'hygrométrie comme il faut...cela pourrait expliquer le mauvais éclatement des mitoses.

merci d'avance.
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