synchronisation des sangs
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Re: synchronisation des sangs
Salut.
On utilise ce kit aussi avec de bons résultats... Milieux de culture de base RPMI (+ Sérum de veaux foétal+héparine+antibio+phyto ) il doit pas y avoir moins chére!! Par contre étuve SANS CO2 ( sinon marche pas chez nous ) les tubes sont inclinées et agités ts les jours ...aprés tech classique comme le votre ...Ouala , bon courage
On utilise ce kit aussi avec de bons résultats... Milieux de culture de base RPMI (+ Sérum de veaux foétal+héparine+antibio+phyto ) il doit pas y avoir moins chére!! Par contre étuve SANS CO2 ( sinon marche pas chez nous ) les tubes sont inclinées et agités ts les jours ...aprés tech classique comme le votre ...Ouala , bon courage
BIOFFICE- Localisation : bordeaux
Nombre de messages : 60
Spécialités : Anténatal ( Trophos, Liq. Amnio. ) postnatal , FISH...
Date d'inscription : 10/02/2009
Réputation : 21
Points : 102
synchronisation des sangs
bonjour,
nous synchronisons nos sangs avec le kit synchro et le milieu synchro P d'euroclone.
si la pousse fonctionne assez bien, nous avons un gros problème de qualité de mitoses, la culture ne semble simplement pas synchronisée...nous avons des petites des grandes mitoses, des trapues, des vers de terre (selon l'expression consacrée!!)...
nous suivons le protocole à la lettre:
0.4 ml de sang dans 5ml de milieu.
100µl de sol A puis 17h après 100µl de sol B (nous cultivons en tube de 5ml bouchon bleu fermé dans une étuve à CO2 ( la seule disponible)
5h après la démécole (2g ( 3et 4g n'amélioraient rien)) pendant 30min ( on a essayé 1h et 1h30 sans amélioration)
puis technique classique 12min de kcl (0.32g pour 100ml) chaud, préfix, fix x3
si des labos utilisent ce kit, avez-vous des problèmes? votre technique est-elle différente de la notre?
on a essayé avec du PAA synchronisé même résultat. doit-on ouvrir les bouchons? mettre les tubes dans une étuve à 37°C normale sans CO2?
A l'aide!!!!
nous synchronisons nos sangs avec le kit synchro et le milieu synchro P d'euroclone.
si la pousse fonctionne assez bien, nous avons un gros problème de qualité de mitoses, la culture ne semble simplement pas synchronisée...nous avons des petites des grandes mitoses, des trapues, des vers de terre (selon l'expression consacrée!!)...
nous suivons le protocole à la lettre:
0.4 ml de sang dans 5ml de milieu.
100µl de sol A puis 17h après 100µl de sol B (nous cultivons en tube de 5ml bouchon bleu fermé dans une étuve à CO2 ( la seule disponible)
5h après la démécole (2g ( 3et 4g n'amélioraient rien)) pendant 30min ( on a essayé 1h et 1h30 sans amélioration)
puis technique classique 12min de kcl (0.32g pour 100ml) chaud, préfix, fix x3
si des labos utilisent ce kit, avez-vous des problèmes? votre technique est-elle différente de la notre?
on a essayé avec du PAA synchronisé même résultat. doit-on ouvrir les bouchons? mettre les tubes dans une étuve à 37°C normale sans CO2?
A l'aide!!!!
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