technique de mise en culture des fibroblastes

par Marianne C Mar 15 Oct - 20:17

Bonjour,
utilisez-vous de la collagénase et/ou de la trypsine pour mettre en culture des fibroblastes?
si oui, comment faites-vous? et en combien de temps obtenez-vous le caryotype en moyenne?
jusqu'à présent, nous découpons (finement) et mettons en culture en flacons de 12,5 cm² avec du Ham.

Merci d'avance

Marianne

par **Admin** Ven 18 Oct - 18:40

bonjour,
on n'utilise pas de trypsine, on pose les explants directement dans le flacon de culture avec un peu (1-1.5ml) de milieu ( chang d) pour qu'ils se fixent. et on rajoute 1ml à j2 et 1 à j3...ça marche assez bien.

par Marianne C Ven 18 Oct - 19:43

nous faisons à peu près comme ça aussi (mais avec un milieu moins riche). ça fonctionne aussi mais nous essayons de savoir si une technique par digestion enzymatique permettrait un démarrage plus rapide de la culture.

Merci pour votre réponse!

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