villosités

Bonjour,

Je vais essayer de mettre les différents soucis que l'on rencontre sur le direct:
- Déjà comme l'a si bien écrit BIOFFICE, le prélèvement est trés important, et s'il ya que de la caduque cela explique l'absence de mitoses. Il faut observer les villosités sous loupe binoculaire pour s'en rendre compte (difficile d'expliquer par écrit à quoi cela ressemble, disons que les villosités apparaissent transparentes et que la caduque à l'aspect "cotoneux" opaque)
- le terme est important, plus le terme est jeune, moins il y a de risques d'échec
- la technique mais je pense que tu as ce qu'il faut
- l'étaleur : il doit être bien calibré càd à bonne hauteur pour éviter de perdre les mitoses
Je ne sais pas si cela t'aidera, le mieux c'est d'aller voir dans un labo proche du tiens qui pratique le direct pour se rendre compte.
Bonne chance, et bon courage.

reconseil pour les villosites!!!!nous avons toujours ce souci de non mitoses a l examen direct des placentos..apres plusieurs contacts avec des labos on nous a dit que le tri de depart du prelevement etait super important...ceci dit comment vous arrivez a faire la difference entre la caduque maternelle et le reste du prelevement? regardez vosu a l oeil nu ou avec une loupe???
merci de vos conseils les cytogenetic girls and boys!!!
cordialement!!!

Salut , c'est vrai que pour les trophos la qualités du prélévement est essentielle. Il faut avant tout de bons préleveurs, il y a qqs années un de nos préleveurs s'acharné à en faire en vain, on à fini par lui dire d'arréter ...! ( non, je ne siterais pas de nom ... )

Sinon pour la technique , aprés nettoyage , on laisse les villositées entre 4h et toute une nuit dans un milieux trés riche ( Chang C + L gluta), arret avec colcémide ( 1h) , choc citrate 1% (15min) , 3 fixe de 10min puis étalement : dilaceration des villositées sous une loupe ds qqs gouttes d'acide acétique à50% et dépot sur lames avec étaleurs... colo et dénat ... , on fait 4 à 5 lames par prélévement , largement de quoi faire 12à 15ç pour le dossier.

bonjour serait il possible d obtenir quelques idees de techniques pour les villosites pour l examen direct qui pose souci au sein de notre labo....aucune mitose a l examen direct ...nous sommes au debut de nos essais mais quand meme j aimerais avoir vos avis sur la question...
merci d avance chers collegues

bonjour,
nous utilisons du RPMI 1640 +L-glutamine, additionné de SVF et de peni-strepto comme milieu de transport pour ponction, pour le nettoyage avant tri et comme milieu de conservation des villosités triées avant mise en culture qui est faite le lendemain des ponctions.
Nous avons pas de souci de culture.

Salut , nous utilisons du RPMI 1640 sans Glutamine, (surtout parceque pas trés cher), de toute façon les villositées n'y reste jamais trés longtemp...

merci, je posais la question parce que deux de mes collègues ont eu une formation sur la culture cellulaire et on leur a dit que le milieu type RPMI ou Chang ou autre était trop riche comme milieu de conservation. Il faut apparemment mieux utiliser un milieu avec le minimum d'éléments pour permettre la survie des cellules...jusqu'à la mise en culture.

Merci quand même!!

Nous utilisons le milieu Amnio Max+complement commercialisé par Gibco.Nous en sommes satisfaits.Bonne journée

bonjour,
j'aimerais connaître le milieu que vous utilisez pour conserver les prélèvements de villosités, en d'autres termes dans quoi arrivent les prélèvements faits au bloc d'accouchement?
nous utilisons du RPMI, mais apparemment ce n'est pas conseillé étant trop riche...